Nature：最強(qiáng)癌基因找到了，居然不在染色體上，華人領(lǐng)銜最新研究

十三 栗子 發(fā)自 凹非寺
量子位 報(bào)道 | 公眾號 QbitAI

癌癥難治，罪魁禍?zhǔn)拙谷皇悄悖?/p>

在癌癥治療領(lǐng)域，曾經(jīng)存在過三次革命：

第一次革命：化療；
第二次革命：靶向療法；
第三次革命：免疫療法。

如今，隨著一篇Nature論文的發(fā)布，又興起了“第四次革命”的說法，主角居然是染色體外DNA?(ecDNA) 。

雖然上世紀(jì)60年代便有人發(fā)現(xiàn)了這種環(huán)狀DNA的存在，也知道它會(huì)攜帶癌基因；但從前沒人直接觀察過ecDNA、沒人指出它對腫瘤的生長有多關(guān)鍵。

而Nature發(fā)布的新研究中，科學(xué)家終于首次直接觀察了ecDNA (不止基因測序)?，并證明了它的重要性：

ecDNA上的癌基因，是腫瘤的整個(gè)基因轉(zhuǎn)錄組當(dāng)中，表達(dá)水平最高的那部分基因。而染色體上癌基因的表達(dá)相對較低。

ecDNA上的癌基因之所以比染色體上的癌基因更能發(fā)揮作用，主要是因?yàn)椴幌袢旧w那樣受到嚴(yán)格保護(hù)，它更容易讀取，能快速擴(kuò)增，具有侵略性。從前，癌癥科學(xué)家專注于染色體，而新的研究有助于改變他們對腫瘤的認(rèn)知。

研究成果來自路德維希癌癥研究所 (Ludwig Cancer Institute) 和加州大學(xué)圣地亞哥分校，論文的一作是位名叫吳思涵的華人學(xué)者。

研究結(jié)果一經(jīng)公布，便引起了廣泛關(guān)注，在知乎熱榜上已有600+萬的熱度。

網(wǎng)友點(diǎn)評，這次發(fā)現(xiàn)或許將帶來癌癥治療領(lǐng)域的第四次革命。

一作吳思涵也站了出來，親自對這個(gè)話題下讀者的種種問題答疑解惑。

今天，量子位就帶大家領(lǐng)略一下這篇重要的研究。

更強(qiáng)大的癌基因

(首先介紹一下，ecDNA不是原本就長在染色體之外，而是在細(xì)胞有絲分裂中期，從染色體上脫落下來成環(huán)的DNA分子，常常帶有癌基因。這是已有的研究成果。)

從前，科學(xué)家們大多是依靠基因測序，來觀察DNA里的癌基因。

一門心思找出那些會(huì)促發(fā)癌癥的基因，卻忽略了基因的物理位置，在癌癥中的意義。

而這個(gè)問題很重要，它會(huì)影響人們對癌癥原理的理解，也會(huì)影響人們尋找治療方案的思路。

既然不能只用基因測序，那還要怎么辦？

首先，團(tuán)隊(duì)把亞顯微結(jié)構(gòu)成像 (Ultrastructrual Imaging) 、光學(xué)匹配 (Optical Mapping) 、全基因組測序 (WGS) 等等搭配在一起，清晰展現(xiàn)出了環(huán)狀DNA的形態(tài)，就是黃色標(biāo)注部分：

雖然，1960年代便有科學(xué)家發(fā)現(xiàn)過ecDNA的存在，也提出它是環(huán)狀DNA，但這篇論文給出了完整的證明，前人沒有做到過。

而在了解結(jié)構(gòu)的同時(shí)，也可以發(fā)現(xiàn)ecDNA上普遍帶有癌基因。

ecDNA上的癌基因和染色體DNA上的癌基因，都會(huì)被轉(zhuǎn)錄，從而推動(dòng)癌癥病情的發(fā)展。

但由于兩類癌基因所在的位置不同，發(fā)揮的作用也無法等同。

下圖可以看出，環(huán)狀DNA比染色體上的線性DNA，擴(kuò)增能力要強(qiáng)許多，也就更有能力支持癌基因的表達(dá)：

也就是說，ecDNA能產(chǎn)生大量的副本。

結(jié)合同一支團(tuán)隊(duì)2017年發(fā)表的Nature研究，有絲分裂當(dāng)中副本不會(huì)平均分到兩個(gè)細(xì)胞里，而是隨機(jī)分配。這就導(dǎo)致不同細(xì)胞之間，ecDNA含量差異巨大，副本越多差異越大。腫瘤細(xì)胞有了充足的多樣性，便能更好地應(yīng)對環(huán)境變化。

這里說的環(huán)境變化，很大程度上是指患者接受了化療/放療等等。換句話說，多樣性可以支持腫瘤快速進(jìn)化，產(chǎn)生抗藥性。這也是晚期癌癥難治的原因之一。

所以，癌基因大量擴(kuò)增之后，就能大量表達(dá)么？

在剛剛發(fā)表的論文里，團(tuán)隊(duì)也用實(shí)驗(yàn)證明，癌細(xì)胞里表達(dá)水平更高的那些癌基因，就是來自ecDNA身上的癌基因：

這是測序結(jié)果，上面是癌基因轉(zhuǎn)錄的mRNA序列，下面是癌基因本身的DNA序列。左邊黃色部分，是高擴(kuò)增高轉(zhuǎn)錄的ecDNA，右邊是低擴(kuò)增低轉(zhuǎn)錄的染色體DNA。

如此一來，高擴(kuò)增與高轉(zhuǎn)錄 (高表達(dá)) 之間的因果關(guān)系，得到了證明。也就是說，比起染色體上的癌基因，ecDNA上的癌基因有更強(qiáng)的力量，推動(dòng)癌癥病情向前發(fā)展。

那么問題來了，ecDNA畢竟是從染色體上脫落的，為什么染色體上的癌基因，就沒有那么大的威力呢？

團(tuán)隊(duì)說，這是因?yàn)閑cDNA的開放性比染色體要強(qiáng)很多。

一是測序?qū)嶒?yàn)證明了，ecDNA表面缺少抑制轉(zhuǎn)錄的組蛋白修飾 (Repressive Histone Mark) ，同時(shí)又有活躍型的組蛋白修飾；而且，這些組蛋白又在啟動(dòng)子 (轉(zhuǎn)錄開始) 的位置上。

相比之下，染色體DNA上的基因，通常是被抑制轉(zhuǎn)錄的。

二是ecDNA作為一種環(huán)狀DNA，沒有染色體的那種高級壓縮結(jié)構(gòu) (Higher-Order Compaction) ，這也會(huì)讓基因轉(zhuǎn)錄變得更容易：

至于ecDNA的大規(guī)模復(fù)制，到底是怎樣達(dá)成的，團(tuán)隊(duì)也還在研究中。

不過，目前的研究成果，帶來的最重要的啟發(fā)大概就是：

不要只盯著染色體上的癌基因，環(huán)狀的ecDNA也可能帶我們找到新的癌癥治療方法。

一作吳思涵現(xiàn)身答疑解惑

按照「謝邀，人在知乎，剛發(fā)《Nature》」的慣例，論文一作吳思涵如約現(xiàn)身知乎，對論文進(jìn)行了答疑解惑。

量子位經(jīng)授權(quán)，對問題和作者的解答做了整理。

問題一：癌癥的三大特性：侵襲性，即癌癥可以把周圍的正常細(xì)胞變成癌細(xì)胞。

這種策略，是不是通過這種ecDNA實(shí)現(xiàn)的呢？畢竟在廣大生物中，通過質(zhì)粒傳遞這種基因水平轉(zhuǎn)移是廣泛存在的——CNS級別

答：首先，我們在下一篇文章中，就有在關(guān)注ecDNA和腫瘤轉(zhuǎn)移的關(guān)系（侵襲暫無數(shù)據(jù)）。但是，這是未發(fā)表數(shù)據(jù)，所以不便透露。而且我個(gè)人還在質(zhì)疑目前數(shù)據(jù)的可靠程度，因?yàn)槲艺J(rèn)為還需要進(jìn)行更多細(xì)致的亞組分析，才能給出答案。

至于ecDNA能否實(shí)現(xiàn)類似質(zhì)粒一般的橫線轉(zhuǎn)移，我們的猜測，是有可能。但是，幾率多大？有沒有生物學(xué)意義？這是目前不清楚的。

問題二：ecDNA怎么從染色體上掉下來？

所有現(xiàn)有的證據(jù)都指向，ecDNA的形成，極大幾率和DNA損傷（尤其是DNA雙鏈斷鏈）有關(guān)。

其中，以前跟我們同一個(gè)實(shí)驗(yàn)樓的前輩有文章表明，lagging chromosome對導(dǎo)致染色體碎裂，并在一些情況下，會(huì)在子代細(xì)胞中形成ecDNA。

但由于他們用的是一個(gè)人造的lagging Y染色體模型，所以跟腫瘤中的情況還是不一樣。不過，這其中應(yīng)該有相通之處。

問題三：ecDNA怎么消除？

答：我們在2014年，有一篇Science文章研究了這個(gè)問題。我們發(fā)現(xiàn)，當(dāng)ecDNA上面含有EGFR基因的時(shí)候，用EGFR的激酶抑制劑，可以“消除”ecDNA。

但是，這些ecDNA會(huì)“藏”到染色體上。一旦撤藥，這些ecDNA就會(huì)死灰復(fù)燃，重新出現(xiàn)。

論文地址：
https://science.sciencemag.org/content/343/6166/72

上圖分別是“拿衣服”，“藥物抵抗”，和“撤藥”狀態(tài)。

其他組也有在做有關(guān)ecDNA的消除機(jī)制，包括有用一些抗癌藥羥基脲來實(shí)現(xiàn)的。

我們實(shí)驗(yàn)室現(xiàn)在已經(jīng)發(fā)現(xiàn)了ecDNA消除的統(tǒng)一機(jī)制，但由于是未發(fā)表數(shù)據(jù)，所以，無可奉告。

問題四：不只有癌基因吧，會(huì)不會(huì)有抑癌基因在上面呢？

答：目前我們只發(fā)現(xiàn)了上面帶有oncogene，但沒有發(fā)現(xiàn)【經(jīng)典的】tumor suppressor gene。（為什么要說是【經(jīng)典】呢，因?yàn)楣碇罆?huì)不會(huì)哪天發(fā)現(xiàn)了哪個(gè)新的抑癌基因呢。而且我將有一篇合作文章，就找到了一個(gè)非經(jīng)典抑癌基因，逃~）

這是我們組2017在Nature上發(fā)的文章的數(shù)據(jù)：
Extrachromosomal oncogene amplification drives tumour evolution and genetic heterogeneity

紅色的是TCGA數(shù)據(jù)庫上擴(kuò)增的原癌基因分布，右邊是我們的樣本?？梢钥闯觯瑑烧咴跀U(kuò)增的原癌基因的類別上，是有相當(dāng)大的重合的。

問題五：ecDNA是否有統(tǒng)一形成機(jī)制？它們的轉(zhuǎn)錄和復(fù)制是否和染色體DNA一樣？

并不清楚是否有統(tǒng)一機(jī)制。我們僅僅知道，在一些情況下，我們可以人工在正常和腫瘤細(xì)胞中創(chuàng)造出ecDNA。但距離這個(gè)ecDNA是否有功能，還有很長的距離要走。

ecDNA的轉(zhuǎn)錄和復(fù)制機(jī)制，是不清楚的。這就是這個(gè)領(lǐng)域有意思的地方，有著大量的未知等著我們?nèi)ヌ剿鳌?/p>

問題六：ecDNA的復(fù)制是怎樣的？類似于質(zhì)粒的自我復(fù)制還是有其他方式？

答：質(zhì)粒復(fù)制可能至少有3種方式，比如θ機(jī)制，滾環(huán)復(fù)制等。但至于ecDNA的復(fù)制方式，跟什么比較像？我們現(xiàn)有的數(shù)據(jù)和假說，有點(diǎn)苗頭。但是，具體怎么樣，我們也不清楚。這也是我們未來將要研究的問題。

別人怎么看？

那么，這樣一個(gè)發(fā)現(xiàn)為什么可能帶來癌癥治療領(lǐng)域的第四次革命呢？

中國科學(xué)院遺傳學(xué)博士李雷在知乎回答了這個(gè)問題，并獲得了近5.2K的點(diǎn)贊。

因?yàn)?，我們找到了癌基因真正在哪里?/p>

在今天，相信路邊擺攤的大爺都知道癌基因這種概念，是的，過去幾十年，借助測序技術(shù)，科學(xué)家們研究了大量的和癌癥相關(guān)的基因，比如nature曾經(jīng)發(fā)不過全球最火的10個(gè)基因，第一個(gè)就是抑癌基因tp53，其他的也大部分都是癌基因，但是，癌基因的物理位置到底在哪里？我們卻一直搞錯(cuò)了。

過去我們一直以為癌基因在染色體上，畢竟正常人的基因都是在染色體上，然而，吳思涵他們的研究卻發(fā)現(xiàn)，在癌癥中，這一情況發(fā)生了改變，癌細(xì)胞中的癌基因竟然從染色體上掉下來，形成了一種特殊的DNA，那就是環(huán)狀ecDNA。

北京大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院博士孟浩巍評價(jià)道：

特別佩服這種原創(chuàng)性的研究，這種研究才真的是開創(chuàng)一個(gè)新領(lǐng)域，能過為眾多研究人員打開一個(gè)新領(lǐng)域的大門；而不是某些人，靠堆人力物力搞軍備競賽，在有限的領(lǐng)域、有限問題里互相搶飯碗。

作者簡介

吳思涵在中山大學(xué)攻讀完博士學(xué)位后，于2014年加入Paul Mischel Lab。

主要研究方向是癌癥遺傳學(xué)和代謝，探究染色體外DNA如何使癌癥適應(yīng)，以及重新編程的細(xì)胞代謝如何支持癌癥生存。

主要學(xué)術(shù)貢獻(xiàn)：

2019：Oncogene amplification in growth factor signaling pathways renders cancers dependent on membrane lipid remodeling.
地址：https://www.sciencedirect.com/science/article/abs/pii/S1550413119303171

2018：Targeting cancer’s metabolic co-dependencies: A landscape shaped by genotype and tissue context
地址：https://www.sciencedirect.com/science/article/abs/pii/S0304419X18300453

2017：Glioblastoma cellular cross-talk converges on NF-κB to attenuate EGFR inhibitor sensitivity
地址：http://genesdev.cshlp.org/content/31/12/1212.short

更多學(xué)術(shù)貢獻(xiàn)詳見：
https://scholar.google.com/citations?hl=en&user=O1e4RfAAAAAJ&view_op=list_works&sortby=pubdate

吳思涵表示，除了科學(xué)，還喜歡音樂、藝術(shù)、烹飪和科技產(chǎn)品，同時(shí)也在幫助運(yùn)營一個(gè)非盈利的科學(xué)社區(qū)，向普通大眾傳播生物和醫(yī)學(xué)科學(xué)。

傳送門

論文：
https://www.nature.com/articles/s41586-019-1763-5

知乎：
https://www.zhihu.com/question/356918720

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